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我們老板在美國的時候做一個蛋白花了六年時間,花了大概幾十萬美金吧。容易一點的蛋白,一套做下來周期是 30-90天,花費數(shù)萬。困難一點的,比如膜蛋白,做出來就是NSC的文章,據(jù)說施一公他們每年買去垢劑的錢就是上百萬。我說的是X-ray。核磁沒做過,具體不清楚。段家一凡(站內(nèi)聯(lián)系TA)自己頂一頂,希望多討論討論月月大可(站內(nèi)聯(lián)系TA)偶在生物物理所做結(jié)構(gòu)做了快兩年,簡單說一下我的看法吧想做結(jié)構(gòu)一般的具有兩個條件:1、軟件:是否具備結(jié)構(gòu)生物學(xué)知識。包括晶體學(xué)內(nèi)容和后期結(jié)構(gòu)修正的基礎(chǔ)。這需要有很多專業(yè)軟件去運算。軟件的使用和參數(shù)的評估是結(jié)構(gòu)修正中最重要的工作。2、硬件:包括蛋白質(zhì)純化、結(jié)晶條件搜索、晶體優(yōu)化和最后的衍射。這都需要配套的儀器和試劑。很多試劑適合長期做的買,單獨做一次買一個kit太虧,kit也太貴。然后我們來看你的蛋白。首先建議在pdb數(shù)據(jù)庫中比對一下,看看有沒有同源蛋白結(jié)構(gòu)已經(jīng)被解析了。不見得是新家族功能上就全新,可能核心區(qū)域很相似。蛋白小是件好事,一般來說小的會比大的容易一些。長晶體一般需要大量高純度的具備生物活性目的蛋白,能不能獲得如此高要求的蛋白是第一道門檻。過了這一關(guān)能不能長出晶體又是一關(guān),有些人做的順利幾周就能過了這一關(guān),我屬于不順的人,做了一年多還沒能長出來晶體。然后是晶體長出來后能不能篩選出來適合衍射條件的晶體又是一個難度,同樣看運氣了。晶體可以衍射以后確定相角還是一個難度,如果有同源度較高的蛋白,那么用分子置換法能確定,如果沒有使用重原子或者硒代甲硫氨酸了。最后是解結(jié)構(gòu)了,還是運氣,順了那么三兩下就出來,不順…………我只對X-ray了解這么多,NMR不了解,請其他人介紹吧。錢沒法給你估計。
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